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簡要描述：細(xì)胞TRANSWELL實驗的實驗步驟：配制結(jié)晶紫染液 transwell侵襲孔的制備 細(xì)胞離心 下室加培養(yǎng)基 上室接種細(xì)胞染色。
更新時間：2022-12-23瀏覽次數(shù)：1217詳細(xì)介紹
Transwell細(xì)胞侵襲作為一項實驗技術(shù)，其主要材料是transwell小室，其外形為一個可放置在孔板里的小杯子，杯子底層有一張具有通透性的膜，這層膜帶有微孔,孔徑大小從01-12um不等。根據(jù)不同需要有不同材料，般常用的是聚碳酸酯膜。將transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱為上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱為下室。上室裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)裝下層培養(yǎng)液，二者以transwel小室底部的聚碳酸酯膜相隔。細(xì)胞種在 上室可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細(xì)胞生長、運動等的影響。運用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜，可以進(jìn)行細(xì)胞共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移細(xì)胞侵襲等各種研究。
Transwell細(xì)胞侵襲實驗
常用8.0、12.0um孔徑的膜，原理與transwell遷移實驗類似。上室種細(xì)胞(一般為腫瘤細(xì)胞)，下室加入FBS或者某些特定的趨化因子，腫瘤細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室運動。但是與遷移實驗不同的是，本實驗中聚碳酸酯膜上室側(cè)鋪有層基質(zhì)膠 ，用以模擬體內(nèi)細(xì)胞外墓質(zhì) 細(xì)胞要想穿過透性膜進(jìn)入下室 ，需要先分泌基質(zhì)金屬蛋白酶( MMPS )將基質(zhì)膠降解，方能通過聚 碳酸酯膜。對進(jìn)入下室的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)即可反應(yīng)細(xì)胞的侵襲能力。
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